EURx (clonage) - Matériel de laboratoire

Kit Universel d'Extraction d'ADN génomique

• Méthode basée sur la précipitation à l'éthanol d'acides nucléiques obtenus à partir de cellules ou tissus lysés avec du réactif GeDI.
• Le réactif GeDI est une solution monophasique ne comportant aucun solvant organique
• L'ADN purifié peut être utilisé pour les applications courantes telles que PCR, clonage, RFLP, Southern blotting, etc.
• Contenu : réactif GeDI pour l'isolation d'ADN total de divers types d'échantillons, tampon ResSol de resuspension, colonnes à centrifuger avec membrane de silice
• Quantités d'échantillons applicâbles : 50 mg de tissu animal, 50 à 200 mg de tissu végétal, 107 cellules animales, bactéries ou levures
• Rendements variables selon le type d'échantillon : 5 à 50 µg pour 10 mg de tissu animal, 10 à 100 µg pour 500 mg de feuille, 4 à 7 µg pour 106 cellules de mammifères, 30 à 40 µg pour 109 cellules bactériennes
• Disponible en version 25 préparations et 100 préparations
• Le réactif GeDI existe aussi en version stand alone

Réactif de stabilisation d'ARN Fix RNA

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• Réactif de stabilisation et de protection rapide des ARN d'échantillons frais et non congelés (tissus, leucocytes, culture cellulaire ou bactérienne)
• Conserve les ARN jusqu'à 7 jours à température ambiante et jusqu'à 4 semaines à 4-8 °C, la conservation pour de plus longues périodes s'effectue à -20 °C ou -80 °C
• 10 volumes de réactif par volume d'échantillon, ou 10 µl par mg d'échantillon

RNA Extracol

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• Réactif d'extraction d'ARN totaux à partir d'échantillons divers (tissus animaux et humains, plantes, cellules, levures et bactéries)
• Composé de phénol et de thiocyanate de guanidinium
• Protocole simple, extraction d'ARN en une heure
• Haut rendement
• Ajustable à la quantité de matériel
• Nécessite l'ajout de chloroforme, d'isopropanol, d'éthanol et d'eau grade biologie moléculaire

Endonucléases de restriction gamme EURx

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La majorité des enzymes de restriction produites par EURx fonctionnent dans le tampon ONE BUFFER et sont utilisables dans le cadre de doubles digestions.
Le tampon réactionnel ONE BUFFER 10X est fourni avec l'enzyme.

T4 DNA Ligase

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• Catalyse la formation d'une liaison phosphodiester entre les extrémités 5'-P et 3'-OH de nucléotides d'ADN ou ARN double brin
• Catalyse la ligation de 2 fragments d'ADN double brin à bouts francs
• Catalyse la ligation de fragments d'ADN à extrémités cohésives complémentaires
• Permet de sceller les cassures simple brin dans les duplex ADN, ARN ou hybrides ADN/ARN
• Convient pour le clonage de fragments digérés par des enzymes de restriction et pour la ligation de linkers ou d'adaptateurs à des ADN à bouts francs
• Disponible en formats 20000 et 100000 unités*
• *Unité d'extrémité cohésive - 200 UEC = 3 unités Weiss

Phosphatase alcaline (CIP)

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• Catalyse l'hydrolyse de monoesters de phosphate
• Utilisable pour retirer l'extrémité 5'-P d'ADN ou d'ARN préalablement à leur étiquetage en 5'
• Utilisée pour retirer les extrémités 5'-P de vecteurs linéarisés pour empêcher leur recircularisation "à vide" pendant les processus de clonages
• Compatible avec la déphosphorylation de protéines
• Disponible en formats 1000 et 5000 unités

Polynucléotide Kinase T4 (PNK)

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• Catalyse la phosphorylation de l'extrémité 5'-OH des molécules d'ADN ou d'ARN simple et double brin
• Catalyse le transfert du phosphate-γ de la molécule d'ATP sur l'extrémité 5'-OH de l'acide nucléique
• Utilisée pour phosphoryler les linkers, adaptateurs et fragments d'acide nucléique préalablement à leur ligation
• Utilisable pour l'étiquetage en 5' d'acides nucléiques avant leur séquençage
• Contient une activité secondaire 3'-phosphatase
• Disponible en formats 1000 et 5000 unités

PfuPlus ! DNA Polymerase

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• Mélange d'ADN polymérase Pfu (Pyrococcus furiosus) et d'un activateur de polymérisation thermostable
• Polymérase recombinante ultrapure, thermostable et proofreading
• Formulation conçue pour synthétiser des séquences d'ADN atteignant jusqu'à 20 kb
• Fidélité plus de 10 fois supérieure à celle d'une Taq standard
• Recommandée pour la PCR haute fidélité, les séquences riches en GC ou avec structures secondaires problématiques, la mutagenèse dirigée et le clonage à extrémités franches (blunt end)
• Utilisable également pour la PCR classique et l'extension d'amorces à température élevée
• Fourni avec un tampon de réaction 10X
• Disponible en formats 100, 500 et 2500 unités
• OnPfuPlus ! ADN polymérase : version hot start, stable à température ambiante, activation en 10 min à 90 °C

Exo-BAP Mix

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• Mix utilisé pour le nettoyage des produits de PCR par action enzymatique préalablement au séquençage ou à l'analyse SNP
• Permet la dégradation des dNTP et amorces non utilisés lors de la PCR et toujours présents dans le mix réactionnel
• Contient de la phosphatase alcaline bactérienne (BAP) thermosensible et de l'exonucléase I dans un tampon formulé spécialement
• Disponible en formats 100 réactions et 500 réactions

Phosphatase alcaline bactérienne (BAP) thermosensible

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• Très adaptée aux techniques d'immunodétection en diagnostic et d'immunomarquages de protéines et acides nucléiques transférés sur membrane
• Catalyse la libération de groupes 5'-P et 3'-P de molécules d'ADN, ARN et de nucléotides
• Supprime les 5'-P de molécules d'ADN, ARN, de rNTP et dNTP
• Utilisée pour retirer les extrémités 5'-P de vecteurs linéarisés pour empêcher leur recircularisation "à vide" pendant les processus de clonages
• Résistante aux changements chimiques et active dans une large variété de tampons de réaction
• Inactivable par la chaleur pendant 5 minutes à 70 °C
• Compatible avec la déphosphorylation de protéines
• Disponible en formats 1000 et 5000 unités

Exonucléase I

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• Catalyse la suppression de nucléotides d'un ADN simple brin dans le sens 3' -> 5'
• Ne dégrade ni l'ADN double brin ni l'ARN
• Idéal pour la dégradation des amorces simple brin à l'issue d'une PCR préalablement au séquençage de l'ADN ou de l'analyse SNP
• Utilisée pour la dégradation d'ADN simple brin dans une préparation d'ADN double brin
• Active dans une large variété de tampons de réaction
• Disponible en formats 4000 et 20000 unités

DNase I (RNase-free)

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• Endonucléase dégradant de façon non spécifique les ADN simple et double brin en libérant des di-, tri- et oligonucléotides phosphorylés en 5'
• Utilisée pour supprimer l'ADN contaminant lors des préparations d'ARN préalablement aux applications de RT-PCR et RT-qPCR
• Utilisée également pour supprimer la matrice ADN du milieu réactionnel à l'issue d'une transcription in vitro
• Disponible en format 1000 et 5000 unités

RNase A (DNase-free)

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• Endoribonucléase pyrimidine spécifique qui dégrade l'ARN simple brin
• Catalyse le clivage de la liaison phosphodiester entre une pyrimidine et le nucléotide suivant
• Utilisée pour la suppression de l'ARN dans les préparations d'ADN
• Disponible en format 10 et 50 mg

T7 Endonucléase I

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• Enzyme structure dépendante reconnaissant et clivant l'ADN mésapparié, les hétéroduplex ADN, les structures ADN en branches, les jonctions de Holliday et les nicks dans l'ADN
• Le clivage intervient au niveau de la première, deuxième ou troisième liaison phosphodiester en 5' du mésappariement
• Enzyme recombinante ultrapure

Applications possibles :
• Reconnaissance de mésappariements d'ADN notamment dans le cadre d'édition du génome par la méthode Crispr
• Résolution de jonction d'ADN à 4 branches
• Détection ou clivage des hétéroduplex ADN et des nicks dans l'ADN
• Disponible en format 250 et 1250 unités